Reagenti analitici per laboratorio per kit di rilevamento quantitativo proteico BCA
Model No.
G2026-1000T
Habit Denominazione
Reattivo Speciale
Applicazione
Industria, Ricerca scientifica, Salute
Proprietà
Reattivo biochimica
conservazione
4ºc
durata a magazzino
12 mesi
mod
1 set
utilizzo dei dettagli
rilevazione quantitativa della concentrazione proteica
Pacchetto di Trasporto
Carton
Specifiche
1000T
Marchio
Servicebio
Origine
China
Prezzo di riferimento
$ 81.00 - 99.00
Descrizione
Descrizione del Prodotto
Introduzione al prodotto:
Esistono due metodi più comunemente utilizzati per la rilevazione quantitativa della concentrazione proteica: Bradford e BCA. Il principio fondamentale della rilevazione quantitativa delle proteine mediante il metodo BCA si basa sulla reazione del biureto, cioè il Cu2+ viene ridotto in condizioni alcaline Cu+, e quindi chelante con BCA (acido bicinconico, un agente cromogenico). Ciascuna molecola chela un Cu, formando un complesso porpora solubile in acqua. La sostanza ha il valore di assorbimento più alto a 562 nm e la profondità di colore è proporzionale alla concentrazione proteica, quindi può essere utilizzata per il rilevamento quantitativo di proteine, la concentrazione proteica ha una buona relazione lineare nell'intervallo di concentrazione di 50 2000μg/ml.
Questo metodo non è influenzato dalle sostanze chimiche presenti nella maggior parte dei campioni, compatibili con alte concentrazioni di sgrassante, SDS, con concentrazioni fino al 5% comprese il 5% di Triton X-100, il 5% di Tween-20,60,80, ecc. ma agenti chelanti e alte concentrazioni di agenti riducenti influenzano i risultati, non garantiscono EGTA, Nei campioni concentrazione di EDTA inferiore a 10 mm, DTT inferiore a 1 mm, β-mercaptoetanolo inferiore a 1 mm. Se il campione contiene un agente chelante o un agente riducente, considerare gli altri prodotti del kit di rilevamento quantitativo delle proteine G2001 Bradford.
Contenuto della confezione :
Componenti:
Condizioni di conservazione :
L'intero kit di reagenti può essere trasportato a temperatura ambiente; lo standard proteico (BSA) viene conservato a 4ºC °C , valido per 12 mesi. Dopo la soluzione standard proteica , conservata a -20ºC e utilizzata entro 6 mesi. I reagenti rimanenti vengono conservati a temperatura ambiente e sono validi per 12 mesi.
Utilizzo :
Soluzione di riserva standard proteica: 1 ml di soluzione di preparazione standard proteica è stata aggiunta alla provetta standard proteica BSA, e 25 mg di standard proteico sono stati completamente disciolti, cioè la soluzione di riserva standard proteica con concentrazione di 25 mg/ml è stata ottenuta. La soluzione standard proteica può essere conservata per - 20ºC per un lungo periodo di tempo.
Preparazione della soluzione di lavoro standard proteico: Prendere una quantità appropriata di 25 mg/ml di soluzione di riserva standard proteica, diluire 50 volte con PBS o soluzione salina normale, ottenere la soluzione di lavoro standard proteico con concentrazione finale di 0,5 mg/ml. Prestare attenzione alla diluizione secondo il metodo a gradiente 10 volte per garantire una diluizione accurata.
Curva standard (metodo di marcatura enzimatica): La soluzione di lavoro standard proteico è stata aggiunta a una piastra a 96 pozzetti secondo 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20ul rispettivamente, e poi aggiunti 20, 19, 18, 16, 12, 8, 4, 0 ul con PBS o soluzione salina normale, e quindi la soluzione di lavoro a gradiente è stata reaggiunta a 20 ul. Quindi curva gradiente di concentrazione proteica di 0, 25, 50, 100, 200, Si sono ottenuti 300, 400, 500 ug/ml.
Preparazione dei campioni da sottoporre a prova: I campioni proteici da analizzare vengono diluiti correttamente (la concentrazione proteica del campione può essere rilevata nella curva standard per garantire che i risultati del test siano credibili) e aggiunti alla piastra a 96 pozzetti in base alla quantità di 20μL per campione. Il campione da testare e lo standard proteico sono stati diluiti con la stessa soluzione.
Preparazione della soluzione di lavoro cromogena BCA: Il reagente BCA e la soluzione di solfato di rame sono stati miscelati uniformemente secondo un rapporto volumetrico di 50:1 per ottenere la soluzione di lavoro cromogena BCA. Il liquido di lavoro cromogenico BCA può essere conservato a temperatura ambiente per 24 h. Ogni campione da analizzare necessita di 200μL, che si suggerisce di preparare su richiesta per evitare sprechi.
6. Test: Aggiungere 200μL di fluido di lavoro cromogeno BCA al foro campione della curva standard e al foro campione da testare miscelare bene (la piastra a 96 pozzetti può essere posizionata sull'oscillatore per 30 s), 37ºC dopo 30 min di reazione, utilizzando la curva standard 0 come riferimento, colorimetria a 562 nm di lunghezza d'onda, Registrare l'assorbanza di ciascun foro. (Nota: La reazione può essere anche a temperatura ambiente 2 h, o 60ºC reazione 30 min. Se la concentrazione di proteina è bassa, si consiglia di 60ºC reazione)
7. Calcolo: La curva standard viene tracciata con il contenuto di proteine di gradiente (μg/ml) come coordinata orizzontale e assorbività come coordinata verticale. In base all'assorbività del campione, la concentrazione proteica (μg/ml) del campione da analizzare nel foro corrispondente si trova sulla curva standard, quindi moltiplicata per il multiplo di diluizione del campione è la concentrazione proteica effettiva del campione da analizzare.
Note :
La rivelazione quantitativa della proteina BCA è fortemente influenzata dalla temperatura e dal tempo, il valore di assorbanza cambierà con il prolungamento del tempo o l'aumento della temperatura. Se il tempo e la temperatura della reazione di colore non possono essere controllati con precisione, si consiglia di effettuare una curva standard per ciascuna determinazione.
2. Quando si prepara una soluzione di riserva standard proteica, è necessario assicurare una dissoluzione sufficiente. Quando si diluisce la soluzione di lavoro standard di proteine, si raccomanda di diluire 10 volte il gradiente, non diluire 50 volte alla volta, in modo da evitare grandi errori.
3. Per garantire una quantificazione accurata delle proteine, è meglio scegliere la stessa soluzione tampone per l'estrazione del campione e la diluizione dello standard proteico, che è coerente con le condizioni di rilevazione. Se il buffer stesso ha un valore di sfondo elevato, si consiglia di utilizzare altri metodi.
4. Durante il funzionamento, indossare indumenti da laboratorio e guanti monouso.
Esistono due metodi più comunemente utilizzati per la rilevazione quantitativa della concentrazione proteica: Bradford e BCA. Il principio fondamentale della rilevazione quantitativa delle proteine mediante il metodo BCA si basa sulla reazione del biureto, cioè il Cu2+ viene ridotto in condizioni alcaline Cu+, e quindi chelante con BCA (acido bicinconico, un agente cromogenico). Ciascuna molecola chela un Cu, formando un complesso porpora solubile in acqua. La sostanza ha il valore di assorbimento più alto a 562 nm e la profondità di colore è proporzionale alla concentrazione proteica, quindi può essere utilizzata per il rilevamento quantitativo di proteine, la concentrazione proteica ha una buona relazione lineare nell'intervallo di concentrazione di 50 2000μg/ml.
Questo metodo non è influenzato dalle sostanze chimiche presenti nella maggior parte dei campioni, compatibili con alte concentrazioni di sgrassante, SDS, con concentrazioni fino al 5% comprese il 5% di Triton X-100, il 5% di Tween-20,60,80, ecc. ma agenti chelanti e alte concentrazioni di agenti riducenti influenzano i risultati, non garantiscono EGTA, Nei campioni concentrazione di EDTA inferiore a 10 mm, DTT inferiore a 1 mm, β-mercaptoetanolo inferiore a 1 mm. Se il campione contiene un agente chelante o un agente riducente, considerare gli altri prodotti del kit di rilevamento quantitativo delle proteine G2001 Bradford.
Contenuto della confezione :
| Cat. No | Descrizione del prodotto | Volume |
| G2026 | Kit di rilevamento quantitativo per proteine BCA | 1000 T. |
Componenti:
| Numero componente | Componente | G2026-1000T |
| G2026-1 | Reagente BCA | 2×100 ml |
| G2026-2 | Soluzione di solfato di rame | 5×1.2 ml |
| G2026-3 | BSA | 5×25 mg |
| G2026-4 | Soluzione BSA | 5×1.5 ml |
Condizioni di conservazione :
L'intero kit di reagenti può essere trasportato a temperatura ambiente; lo standard proteico (BSA) viene conservato a 4ºC °C , valido per 12 mesi. Dopo la soluzione standard proteica , conservata a -20ºC e utilizzata entro 6 mesi. I reagenti rimanenti vengono conservati a temperatura ambiente e sono validi per 12 mesi.
Utilizzo :
Soluzione di riserva standard proteica: 1 ml di soluzione di preparazione standard proteica è stata aggiunta alla provetta standard proteica BSA, e 25 mg di standard proteico sono stati completamente disciolti, cioè la soluzione di riserva standard proteica con concentrazione di 25 mg/ml è stata ottenuta. La soluzione standard proteica può essere conservata per - 20ºC per un lungo periodo di tempo.
Preparazione della soluzione di lavoro standard proteico: Prendere una quantità appropriata di 25 mg/ml di soluzione di riserva standard proteica, diluire 50 volte con PBS o soluzione salina normale, ottenere la soluzione di lavoro standard proteico con concentrazione finale di 0,5 mg/ml. Prestare attenzione alla diluizione secondo il metodo a gradiente 10 volte per garantire una diluizione accurata.
Curva standard (metodo di marcatura enzimatica): La soluzione di lavoro standard proteico è stata aggiunta a una piastra a 96 pozzetti secondo 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20ul rispettivamente, e poi aggiunti 20, 19, 18, 16, 12, 8, 4, 0 ul con PBS o soluzione salina normale, e quindi la soluzione di lavoro a gradiente è stata reaggiunta a 20 ul. Quindi curva gradiente di concentrazione proteica di 0, 25, 50, 100, 200, Si sono ottenuti 300, 400, 500 ug/ml.
Preparazione dei campioni da sottoporre a prova: I campioni proteici da analizzare vengono diluiti correttamente (la concentrazione proteica del campione può essere rilevata nella curva standard per garantire che i risultati del test siano credibili) e aggiunti alla piastra a 96 pozzetti in base alla quantità di 20μL per campione. Il campione da testare e lo standard proteico sono stati diluiti con la stessa soluzione.
Preparazione della soluzione di lavoro cromogena BCA: Il reagente BCA e la soluzione di solfato di rame sono stati miscelati uniformemente secondo un rapporto volumetrico di 50:1 per ottenere la soluzione di lavoro cromogena BCA. Il liquido di lavoro cromogenico BCA può essere conservato a temperatura ambiente per 24 h. Ogni campione da analizzare necessita di 200μL, che si suggerisce di preparare su richiesta per evitare sprechi.
6. Test: Aggiungere 200μL di fluido di lavoro cromogeno BCA al foro campione della curva standard e al foro campione da testare miscelare bene (la piastra a 96 pozzetti può essere posizionata sull'oscillatore per 30 s), 37ºC dopo 30 min di reazione, utilizzando la curva standard 0 come riferimento, colorimetria a 562 nm di lunghezza d'onda, Registrare l'assorbanza di ciascun foro. (Nota: La reazione può essere anche a temperatura ambiente 2 h, o 60ºC reazione 30 min. Se la concentrazione di proteina è bassa, si consiglia di 60ºC reazione)
7. Calcolo: La curva standard viene tracciata con il contenuto di proteine di gradiente (μg/ml) come coordinata orizzontale e assorbività come coordinata verticale. In base all'assorbività del campione, la concentrazione proteica (μg/ml) del campione da analizzare nel foro corrispondente si trova sulla curva standard, quindi moltiplicata per il multiplo di diluizione del campione è la concentrazione proteica effettiva del campione da analizzare.
Note :
La rivelazione quantitativa della proteina BCA è fortemente influenzata dalla temperatura e dal tempo, il valore di assorbanza cambierà con il prolungamento del tempo o l'aumento della temperatura. Se il tempo e la temperatura della reazione di colore non possono essere controllati con precisione, si consiglia di effettuare una curva standard per ciascuna determinazione.
2. Quando si prepara una soluzione di riserva standard proteica, è necessario assicurare una dissoluzione sufficiente. Quando si diluisce la soluzione di lavoro standard di proteine, si raccomanda di diluire 10 volte il gradiente, non diluire 50 volte alla volta, in modo da evitare grandi errori.
3. Per garantire una quantificazione accurata delle proteine, è meglio scegliere la stessa soluzione tampone per l'estrazione del campione e la diluizione dello standard proteico, che è coerente con le condizioni di rilevazione. Se il buffer stesso ha un valore di sfondo elevato, si consiglia di utilizzare altri metodi.
4. Durante il funzionamento, indossare indumenti da laboratorio e guanti monouso.
Agenti Chimici
-
Bottiglia d'acqua Qianlu, mini bicchiere con bariletto in acciaio inox Food Thermal per i lavoratori in ufficio
Dimetil solfossido DMSO CAS67-68-5 per solventi industriali
Norme sul traffico ODM CE OEM sicurezza di guida alcol tester automatico Breathalyzer digitale
Casa di lusso europea Mobili soggiorno Set divano con caffè Tabella
Materiali grezzi reagenti analitici organici CAS 37418 -88-5 blocchi da costruzione organici Intermedio farmaceutico 4-idrossi 3-HP
Bilancia analitica da 0,1 mg (tipo elettromagnetico)
1.5D 1.2D fibra in viscosa tinta rayon
Miglior fornitore di TV 4K X96 X6 Smart IPTV Set Scatola superiore
Serratura a mortasa anteriore lunga standard europea serratura a mortasa vecchia Sostituzione
Vendita a caldo 10 pd olio da cucina piccola linea di raffineria
Xinya 220V 60Hz 50L 13 galloni compressore d'aria senza olio In vendita
Esempio gratuito! Adesivo a inserto chip Huahao HF/UHF 13,56 MHz/860-960 MHz R6/M750/H9/H10
Guarnizione bullone contenitore codice a barre anti-spin ad alta sicurezza all'ingrosso
Decorazione domestica decorativa moderna dell'interno chiara della parete LED con la decorazione chiara dell'hotel di scintillio dei pixel DMX Ws2813 10W del mattone 40 moderna
Portachiavi con portachiavi con cinturino RFID da 125 kHz EM4100 con token di sicurezza RF 74 mm 65 mm
Carta per adesivi a specchio riflettente per etichette piccole
SUPERAUTO.CAT, 2023