Enteropeptidase CAS: 9014-74-8

N. CAS: 9014-74-8

È una proteasi altamente specifica che riconosce la sequenza di ASP ASP Lys e idrolizza il polipeptide al C-terminale di Lys. Può trasformare il tripsinogeno in pancreatina, o può tagliare la proteina di fusione con questa sequenza di riconoscimento. A causa della sua elevata specificità e dell'elevata efficienza di idrolisi, l'enterochinasi è stata ampiamente utilizzata nello sviluppo di prodotti di ingegneria genetica. Una delle sue applicazioni è come proteasi utensile per la scissione specifica di proteina di fusione ricombinante, specialmente per l'industria farmaceutica di bioingegneria e la ricerca di ingegneria genetica, biochimica, biologia molecolare, ecc.

Questo prodotto è una enterochinasi bovina altamente purificata ed attiva secreta ed espressa da lievito ricombinante, che ha un'ampia gamma di applicazioni (4-45oc, ph4,5-9.5), e ha ancora alcune attività in presenza di vari detergenti e denaturanti.

Enterochinasi: Enterochinasi; enteropeptidasi

Altri nomi di enterochinasi: Peptidasi; enteroproteinasi; enteropeptidasi; attivatore intestinale; ekase destra è digestione intestinale

Livello: Ricombinante

Definizione dell'attività di enterochinasi: Il 95% di tioredossina-np-27, 0,5 mg, viene degradato a np-27 entro 16 ore a 37°C, e la quantità di enzima richiesta viene definita come 1 unità attiva

Proprietà: Liquido di sterilizzazione, ricombinanti

Funzione principale: Per la ricerca biochimica. L'enterochinasi è una serina proteasi, che può idrolizzare in modo efficace e specifico la proteina di fusione espressa dai batteri ingegneristici (l'ordine di riconoscimento è - (ASP) 4Lys ↓ -) e rilasciare la proteina bersaglio. Poiché l'enterochinasi ha le caratteristiche di elevata specificità e di elevata efficienza di idrolisi, è ampiamente utilizzata nello sviluppo di prodotti di ingegneria genetica. Essa può essere usata come proteasi per identificare e tagliare specificamente il sito di taglio di enterochinasi contenente il substrato. Una delle sue applicazioni è come strumento di proteasi per la rottura specifica di proteine ricombinanti, in particolare per l'industria farmaceutica bioingegneristica e l'ingegneria genetica Biochemistry, biologia molecolare, ecc. tuttavia, la fonte di enterochinasi naturale è limitata, e l'enterochinasi estratta da tessuti animali contamina , che rende l'applicazione pratica difficile. Ciò richiede la produzione di enterochinasi ad alta purezza mediante ingegneria genetica. L'enterochinasi ad alta purezza prodotta dall'ingegneria genetica è simile all'enzima naturale, ma la velocità di taglio dell'enterochinasi è più rapida.

Ambiente di stoccaggio: - 20 ºC

Esistono molti tipi di reagenti chimici per enterochinasi. Esistono diversi standard per la classificazione e la classificazione dei reagenti chimici nel mondo.

IUPAC classifica i materiali di riferimento chimici come segue:

Classe A: Standard di peso atomico.

Classe B: Il materiale di riferimento più vicino alla classe A.

Grado C: Reagente standard con contenuto di 100 + - 0.02%

Grado D: Reagente standard con contenuto di 100 + - 0.05%

Grado e: Reagente con purezza determinata confrontando i gradi C o D come standard

I reagenti chimici possono essere suddivisi in reagenti standard, reagenti generici, reagenti biochimici, ecc. a seconda del loro utilizzo. Nel nostro paese, è consuetudine chiamare i reagenti di grado C e D equivalenti ai reagenti standard IUPAC.

Fattori comuni che influenzano l'attività dell'enterochinasi ricombinante: Azienda biologica di distribuzione di reagenti tulai Biological

>2M urea,>250mm NaCl,>20mm b-ME,>0.1% SDS,>50mm imidazolo.

Se la soluzione campione contiene uno o più dei componenti di cui sopra, per ottenere i risultati ideali del taglio enzimatico, si prega di dializzare prima il campione in tampone di reazione da 1 ×, quindi di eseguire l'esperimento di taglio enzimatico.

·Digestione enzimatica di enterochinasi bovina ricombinante:

Ciascuna reazione conteneva 15 μ g di tioredossina-np-27 e diverse quantità di enterochinasi. Dopo 16 ore di reazione a 37°C, è stato utilizzato SDS-PAGE gel a 15°C per rivelare l'effetto di taglio enzimatico. Il contenuto enzimatico di ciascuna reazione è il seguente:

Corsia A: No REK corsia B: 0.0008 unità

Corsia C: 0.0015 unità corsia D: 0.003 unità

Corsia e: 0.008 unità corsia F: 0.015 unità corsia G: 0.03 unità